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• 早めの解答お願いします。Aにはパラホルムアルデヒドを加え15分、トリトンX-100を....

  早めの解答お願いします。Aにはパラホルムアルデヒドを加え15分、トリトンX-100を加え5分置き、Bには冷えたメタノールを加え20分置き細胞を固定しました。この時のメタノールはなぜ冷やしたのでしょうか？またパラホルムアルデヒドとトリトンX-100ではどのような反応が起きているのでしょうか？後にPSBで洗いを行い、BSAをAB両方に入れブロッキングしたのですがブロッキングの目的は何なのでしょうか？そしてFidcファロイジンという抗体をAに、DAPIをBに入れたのですがFidcファロイジンはどのように微少繊維を染色するのでしょうか？初歩的な事を多々質問して申し訳ないですが宜しくお願いします。
  解決日時：Mon, 24 Nov 2008 22:48:15 +0900　/　 回答数：2　/　 スコア：130,571点
  

• シアノアクリートとホルムアルデヒドは別物ですか？

  シアノアクリートとホルムアルデヒドは別物ですか？シアノアクリートとホルムアルデヒドは別物ですか？それともシアノアクリートにホルムアルデビトが含まれていたり？解釈がまちがっているかも知れませんが、シアノアクリートが主な成分の接着剤を使用しているのですがホルムアルデビトが含まれているなら困るのでお尋ねしました。
  解決日時：Tue, 23 Oct 2007 03:53:31 +0900　/　 回答数：1　/　 スコア：89,755点
  

• ふつう、(HCHO)n というとトリオキサンとパラホルムアルデヒドのどちらを指します...

  ふつう、(HCHO)n というとトリオキサンとパラホルムアルデヒドのどちらを指しますか？
  解決日時：Fri, 17 Dec 2004 15:47:48 +0900　/　 回答数：1　/　 スコア：76,091点
  

• 細胞の固定を行うのに４％パラホルムアルデヒドを使用予定ですが、作製方法がわか....

  細胞の固定を行うのに４％パラホルムアルデヒドを使用予定ですが、作製方法がわかりません。詳しく教えていただけませんか？
  解決日時：Thu, 22 May 2008 03:01:24 +0900　/　 回答数：1　/　 スコア：93,174点
  

• 細胞の固定操作について part.2

  細胞の固定操作について part.2以前、細胞の固定操作について質問させていただきました。その時、固定時間と固定液の種類が重要で、それらの違いによりタンパクの抗原性を失ったり、構造が破壊されたりするといったことを教えていただきました。それからというものあまり固定操作について考えずにいたのですが、今回再びそれについて勉強をする機会があり、新たな疑問がわいてきたので質問させていただきます。「パラホルムアルデヒドやホルムアルデヒドは細胞膜透過性試薬であるので、それらで処置することで高分子である抗体が通過するようになる。そして、それに二次抗体を反応させることにより細胞内の構造を観察することができる。」恥ずかしながら、私は以前にこれに似た文章を見てこれらの固定液が細胞膜の透過性を上げることで普段では透過しない分子を透過するようにしているということをはじめて知りました。そこで、質問があります。私は今まで細胞固定とは生きている状態の構造を保つための操作という認識を持っていました。文字通りこの認識で間違っていないとは思うのですが、以上に挙げた内容から考えるとすれば固定操作とは「細胞膜の透過性を上げるための操作」とも言うことができると思います。実際のところ固定の定義とはどういうものなのでしょうか？また、この質問に付属してもう１つ質問があります。比較的低分子の物質（非タンパク性のもの）で容易に細胞膜を通り、それ自体が蛍光を発する物質があるとします。こういったものを使ってサンプル調製を行い、その調製したサンプルを次の日にレーザー顕微鏡で測定する場合、そのままでは細胞内に入った蛍光物質が細胞外に出ていく（可能性がある）ため、一般的に固定を行うと思います。しかし、パラホルムアルデヒドなどで固定を行えば、前に述べたように細胞膜の透過性をあげてしまい、逆に細胞外に出てしまうのではないかと思うのですが、どうなのでしょうか？やはり固定時間の問題なのですか？今、固定操作について自分の中でかなりの矛盾が生じており、迷宮入りしている状態です。そのため、もしこの疑問について解決できる人がいらっしゃればご教授願います。p.s. もし固定操作について詳しく載っている参考書などがあれば勉強したいので教えていただきたいです。（できれば複数教えていただければ幸いです）
  解決日時：Sat, 08 Mar 2008 05:28:06 +0900　/　 回答数：1　/　 スコア：64,550点
  

• 細胞の固定操作について教えてください。

  細胞の固定操作について教えてください。現在、胸腺細胞を１５分以上固定したのちブロッキングして、一次抗体・二次抗体を反応させて蛍光を観察しています。そこで２点教えていただきたい事があります。①固定操作の時間によって一次抗体・二次抗体に対して何らかの影響はあるのでしょうか？　今、固定液として４％パラホルムアルデヒドを用いて、２日間冷蔵保存している細胞があります。　例えば、そのような細胞と３０分間、４％パラホルムアルデヒドで固定した細胞に一次抗体・二次　抗体を反応させて蛍光を見た時違いは生じるのでしょうか？？　またわかればその理由も教えていただければ幸いです。②上記に関連したことですが、ある企業が出している蛍光色素のプロトコールに「3.7%パラホルムア　ルデヒドで10分固定」という操作があるのですが、ただいま仕事が山積みで１日ではいくつも実験　が出来ない状態です。　そこで胸腺細胞を日単位で固定して近いうちにやりたいと思っているのですが、そういうことは可能　なことなのでしょうか？？　こちらの方も回答よろしくおねがいします。　↓念のためプロトコールのURLを載せておきます↓　http://probes.invitrogen.com/media/pis/mp00354.pdf
  解決日時：Wed, 26 Sep 2007 03:45:46 +0900　/　 回答数：1　/　 スコア：64,798点